Algengar spurningar um miðflótta síunartæki

Q1. Nauðsynlegt er að aðgreina prótein með mismunandi mólmassa, svo hversu mikinn mun þarf mólþyngd próteinanna að vera?

A: Stærð próteinanna tveggja þarf að vera 10 sinnum mismunandi eða meira.

 

Q2. Getur skilvinduAlsíunartæki vera sótthreinsuð og ónæm fyrir basaþvotti?

A: Það er hægt að dauðhreinsa hana með 75 prósenta etanólvatnslausn og himnan þolir 0.1-0.5N natríumhýdroxíð alkalíþvott.

 

Q3. Hvernig á að takast á við ef próteinið fellur út við einbeitingu?

A: Ef próteinið er of hratt eða of einbeitt getur það valdið próteinútfellingu og endanlegur styrkur próteins eftir styrk ætti ekki að vera of hár; Prótein sem eru næm fyrir einbeitingarhraða og hafa tilhneigingu til að falla út, leiðbeinandi úrbótaaðferð:

Dragðu úr miðflóttahraðanum

Notaðu ofsíunarhimnu með hærri mólþungaskerðingu

Blástu og sogðu þétta rörið og skildu síðan

 

Q4. Hver er hugsanleg ástæða fyrir því aðmiðflótta síunartækier ekki hægt að skila niður?

A: Þú getur notað um það bil 20 prósent etanól vatnslausn fyrir upphaflega skilvindu ef ekki er hægt að skila ofsíunarrörinu, vegna þess að ofsíunarhimnan er alveg þurr, yfirborð himnunnar er veikt vatnsfælnt og flæðið er hægt að endurheimta eftir íferð með lágum yfirborðsspennu leysir.

 

Q5. Réttar notkunaraðferðir og geymsla miðflóttasíubúnaðar

A: Miðflótta síubúnaðurinn ætti að skila með hreinsuðu vatni fyrir notkun til að sannreyna heilleika þeirra. Eftir hverja notkun þarf að geyma það í blautu ástandi til að koma í veg fyrir að himnan þorni.

 

Q6. Hvernig fjarlægir miðflótta síunartæki endotoxín?

A: Miðflóttasíutækin sem við útveguðum hafa ekki verið meðhöndluð með endotoxínum og þar sem endotoxin eru til víða í náttúrunni er hægt að forhreinsa sýni sem þurfa endotoxin með 0.5N natríumhýdroxíði fyrir tilraunina og þvo þau síðan með RO vatn til að fjarlægja megnið af endotoxíninu.

 

Q7. Þegar þétta próteinið er notað til niðurstreymisgreiningar kemur í ljós að það er truflun, hver er ástæðan?

A: Hægt er að forþvo miðflóttasíubúnaðinn með stuðpúðalausn eða hreinsuðu vatni. Ef truflunin er enn til staðar, þvoðu með 0.1N natríumhýdroxíði og þvoðu síðan með hreinsuðu vatni.

 

Q8. It kemur í ljós að ekkert markprótein er í þykkninu eftir styrkingu. Hverjar eru mögulegar ástæður?

A: 1) Upphafsstyrkur próteinsins ætti ekki að vera of lágur, ef styrkurinn er of lágur gæti himnan ekki haldið.

2) Veldu viðeigandi himnuholastærð. Miðflóttastyrkur síurörsins tilheyrir blindgötusíun og himnuholastærð er yfirleitt minni en 2 sinnum eða meira en markpróteinið.

3) Veldu réttan miðflóttahraða

4) Hvort markpróteinið fellur út

 

Q9. Aðgerðameðferð miðflóttasíubúnaðar

A: Hlutlaus formeðferð á yfirborði miðflóttasíubúnaðarins getur dregið úr aðsogstapi próteina á himnuyfirborðinu, í flestum tilfellum getur formeðferð á súlunni áður en þynnt próteinlausnin er einbeitt bætt bata, vegna þess að lausnin getur fyllt óvarinn tómir prótein aðsogsstaðir á himnunni og yfirborðinu, aðgerðaraðferðin er að bleyta súluna með miklu rúmmáli af aðgerðarlausn í meira en 1 klukkustund, skola súluna vandlega með eimuðu vatni og síðan skilvindu súluna einu sinni með eimuðu vatni til að fjarlægja aðgerðarlausnina sem kann að vera eftir á himnunni að fullu, gæta þess að láta himnuna ekki þorna eftir aðgerðarlausn, ef þú vilt geyma hana til framtíðarnotkunar þarftu að bæta við dauðhreinsuðu eimuðu vatni til að halda himnunni blautu., vinsamlegast hafðu samband við verkfræðingar okkar fyrir algengar aðgerðarlausnir.

 

Q10. Síur ofsíunarhimnan sameindirnar stigveldislega?

A: Generally speaking, if the dead-end filtration method is used, it is difficult to accurately remove small molecules among several large molecules by ultrafiltration method. This is because the membrane is a porous network structure, and its filtration mechanism is based on retention rather than passage, such as, the cut off rate of molecules larger than 100kd is >95 prósent ef þú notar 100kd ofursíunarhimnu, sameindir sem eru minni en svitaholastærð himnunnar fara hins vegar ekki alveg frjálslega í gegnum himnuna. Sameindasöfnunarhlutfallið 67kd er meira en 70 prósent og próteinið 43kd er líka meira en 40 prósent skorið, hinir ýmsu efnisþættir í blandaðri lausn fara í gegnum himnuna ekki eins einfalt og auðvelt og einþátta lausn, í reynd , ef þú vilt einangra tvær stórsameindir ætti mólþyngdarmunurinn á milli þeirra að vera átta sinnum eða meira.

 

Q11. Hvernig á að aðskilja stórar og litlar sameindir á áhrifaríkan hátt með ofsíun?

A: Vegna þarfa ferlisins eru óhreinindi í stórsameindunum fjarlægð, eða litlu sameindirnar fjarlægðar úr stórsameindunum, það er eðlilegt í framleiðslu. Það er mjög nauðsynlegt að velja viðeigandi himnuholastærð, síunaraðferð og rekstrarskilyrði. Almennt talað, ef MWCO forskrift himnunnar er valin á milli próteinanna tveggja, er hægt að ná tiltölulega kjörnum aðskilnaði. Ef próteinlausnin er tiltölulega þynnt mun rekstur undir lágum þrýstingi einnig hjálpa til við að ná betri árangri. Veldu snertiflæðissíun og framkvæmdu margfalda síun til að fá betri aðskilnaðaráhrif.