Áhrif ofsíunarhimna með mismunandi svitaholastærðum á endotoxínfjarlægingu

Samkvæmt tölfræði okkar, í flestum tilfellum, getur val á himnusnældum með himnuop sem er 10kd eða lægri í raun stöðvað flest endotoxín, dregið úr endotoxíninnihaldi í mjög lágt stig og uppfyllt þarfir flestra lækninga- og lyfjaiðnaðarumsókna. Magn þess að draga úr endotoxíninnihaldi var mismunandi með mismunandi svitaholastærð. Í ljósi þessa þáttar höfum við gert nokkrar rannsóknir, innihaldið er sem hér segir:

 

Hvað er endotoxín

Endotoxín, einnig þekkt sem lípópólýsykra, lípíð A, hitagjafi, er einstök uppbygging á ytri vegg frumuvegg Gram-neikvædra baktería (GNB), og er flókið með háan hlutfallslegan mólmassa. Vegna efnafræðilegrar misleitni endotoxins getur hlutfallslegur mólmassi endotoxins frá mismunandi uppruna verið breytilegur frá þúsundum upp í tugþúsundir, og vegna amfísækni endotoxins getur það myndað tengsl í vatni og hlutfallslegan mólmassi sambands þess. getur náð 400,000 til 1,000,000.

 

Af hverju ætti að fjarlægja endotoxín

1. Hlutverk endotoxins

Endotoxín hefur umtalsverð hitamyndandi áhrif á spendýr. Bakteríurnar verða eitraðar þegar þær deyja eða festast við aðrar frumur. Lítið magn af endotoxíni (2 ng/kg líkamsþyngdar) sem sprautað er í bláæð getur valdið hita og stórir skammtar geta valdið blóðrásartruflunum og endotoxínsjokki. Samkvæmt ákvæðum innlendrar lyfjaskrár ætti innihald endotoxíns í lyfi eða efnablöndu að vera undir tilskildum mörkum. Til dæmis, fyrir albúmín í blóði úr mönnum, ættu mörkin fyrir innihald endótoxíns úr bakteríum að vera undir 2 ESB/ml í samræmi við prófunaraðferð fyrir endótoxín úr bakteríum í líffræðilegum afurðum. Mörkin fyrir endotoxín úr bakteríum í interferónum ættu að vera undir 10 ESB/ml.

 

2. Endotoxínmengun

Endotoxín hefur augljós líffræðileg áhrif bæði in vivo og in vitro. Í frjálsum frumukerfum geta endotoxín í nanógrömmum styrk haft áhrif á hegðun sérstakra tegunda frumna og jafnvel sameinda og haft þannig áhrif á eðlilega lífeðlisfræðilega starfsemi.

Þess vegna er endotoxín mengunaruppspretta flestra líffræðilegra efna og tilvist þess gerir það að verkum að margar líffræðilegar og lyfjaprófanir virðast óskipulegar niðurstöður, sem veldur framleiðslu erfiðleika.

(1) Mengun lyfja. Til dæmis geta margs konar vestræn lyf sem eru tilbúin með efnafræðilegum aðferðum og hefðbundin kínversk lyf unnin úr plöntum verið menguð af endotoxínum við myndun þeirra eða útdrátt.

(2) Hráefni til framleiðslu. Ýmsar blóðafurðir og frumuefni geta einnig verið meira eða minna menguð meðan á undirbúningsferlinu stendur.

(3) Líffræðilegir aðilar. Til dæmis, interferon, interleukin eða ýmis lækningaprótein eða peptíð framleidd með DNA-röðunartækni, notkun E. coli sem tjáningarbera í framleiðsluferlinu eða ýmsir ytri þættir, það er erfitt að forðast endotoxínmengun.

 

Hugmyndin um að fjarlægja endotoxín með ofsíun

Vegna mikils hlutfallslegs sameindamassa endotoxina er hægt að nota ofursíunarhimnur til að fjarlægja endotoxín úr vatni. Val á svitaholastærð og efni ofsíunarhimnunnar fer eftir hlutfallslegum mólmassa, eiginleikum og pýrógeninnihaldi lyfsins sem verið er að meðhöndla. Til að halda mestu pýrógeni er nauðsynlegt að nota ofsíunarhimnu með hlutfallslegan mólmassa upp á 5000 eða 10000, en þá er þrýstingurinn á aðgerðinni hærri og það er ekki hentugur fyrir sum lyfjablöndur sem innihalda stóran hlutfallslegan mólmassa íhlutir. Vegna þess að fjarlæging pýrógen mun halda eða gleypa virku innihaldsefnin í vökvanum og afrakstur vörunnar hefur mikil áhrif.

Þar sem endotoxín sameindir eru neikvætt hlaðnar við hlutlausar aðstæður, getur val á jákvætt hlaðnum efnum eins og pólýsúlfóni, pólýakrýlonítríl, pólýamíði og öðrum örgjúpum síunarhimnum aukið flutningsáhrif endótoxínsameinda. Að auki er það einnig aðferð til að lita kísilgúr á sellulósafilmuna og síðan aðsoga jákvæða fjölraflausn á hana til að fjarlægja endotoxín. Hins vegar voru fjarlægingaráhrif þessara hlaðna örporu himna á endotoxín mjög fyrir áhrifum af pH. Djúpsía Guidling Technology er með kísilgúr sem hægt er að velja að vild hvort bæta eigi við jákvæðri hleðslu í samræmi við ferli notandans. Í því ferli að fjarlægja óhreinindi eins og frumur, frumurusl og ýmis prótein, getur innri náttúruleg porous uppbygging þess aukið himnuálag síunar.

 

Endotoxín fjarlægingaráhrif ofsíunarhimna með mismunandi svitaholastærðum

 

Hér er fjallað um fjarlægingaráhrif ofsíunarhimna frá nokkrum mismunandi uppsprettum tilfella til að fjarlægja endotoxín:

1. Fjarlæging á endotoxíni úr bakteríum í Shengmai inndælingu með ofsíunaraðferð

1.1 Inngangur

Pulse Injection er eins konar dauðhreinsuð vatnslausn sem er gerð úr pulse SAN með endurbótum á skammtaformi. Það er samsett úr rauðu ginsengi, ophiopogon og schisandra schisandrae. Það hefur jákvæð áhrif á að endurlífga qi púls, styrkja og koma á stöðugleika ofþornunar, stöðugleika blóðþrýstings, auka samdráttarkraft hjartavöðva og hefur góð klínísk áhrif við meðhöndlun hjarta- og æðakerfis og innkirtlasjúkdóma.

 

1.2 Himnuíhlutir

Leiðandi ofsíunarhimna (hlutfallslegur mólmassi hlerunar 10,30,100 kDa)

 

1.3 Tilraunaaðferðir

1.3.1 Undirbúningur púlsframleiðandi fljótandi milliefna

Sjá undirbúningsferli Zhongsheng Mai inndælingar í National Drug Standard (WS3-B-2865-98-2011) og endurskoðun þess (ZGB2011-48). Vega 100 g af rauðu ginsengi, 312 g af ophiopogon og 156 g af schisandra chinensis, rautt ginseng var dregið út með etanólbakflæðisaðferð og ophiopogon chinensis og schisandra chinensis voru dregin út með gufueimingaraðferð og 1L af vökva sem myndaði milliefnislyf fékkst ( hver 10 ml jafngilti 1 g af rauðu ginsengi, 3 g af ophiopogon og 1,5 g af schisandra chinensis).

 

1.3.2 Ofsíun

Tekið var ákveðið magn af púlsmyndandi vökva milliefni, pH var stillt í 7,5 og sett í ofsíunarkerfið sem var meðhöndlað með vatni. Eftir að 10,30,100 kDa hlutfallslegur mólþungi pólýeter ofsíunarhimna var stöðvaður var ofsíað og ofsíunarlotan jafnvægi í 60 mín. Eftir að ofsíuninni var lokið var endurheimtarhlutfall (R) fyrir ginsenosíð Rg1, Re, Rb1 og schisandrin A reiknað út. Innihald endotoxíns úr bakteríu fyrir og eftir ofsíun var magnmælt með kraftmikilli gruggaaðferð og fjarlægðarhraði bakteríuendatoxíns í vökvanum var reiknaður út (Q).

R=Sía /Frumstæða ×100%

Q= (C -C sía) /C ×100%

Í formúlunni er A hámarksflatarmál hvers virks efnis í útsíunarefninu, A er hámarksflatarmál hvers virks efnis í upprunalegu lyfjalausninni, C er innihald baktería endotoxins í útsíunarefninu og C er innihald bakteríu endotoxín í upprunalegu lyfjalausninni.

 

1.4 Ákvörðun á gegndræpi virkra efna

After ultrafiltration of two kinds of ultrafiltration membranes (with the relative molecular weight of 10, 30, 100kDa retained), the permeability of each active component is shown in Table 1. The results showed that with the increase of membrane pore size, the permeability of effective components increased correspondingly. When the pore size of the membrane reaches 100 kDa, the permeability of the effective components is equal to >. 90%, og öll þrjú virku innihaldsefnin geta farið í gegnum 100 kDa ofsíunarhimnu. Hámarksflatarmál hvers virks efnisþáttar í 100 kDa himnuofsíunarlausninni fyrir og eftir litskiljun var borið saman með HPLC, sem gaf til kynna að nánast ekkert tap væri á 4 efnisþáttum.

 

1.5 Rannsókn á fjarlægingaráhrifum endotoxins úr bakteríum

Innihaldsbreytingar bakteríutoxíns í púlsframleiðandi fljótandi milliefni fyrir og eftir ofsíun með ofsíunarhimnu eru sýndar í töflu 2. Niðurstöður sýndu að innihald endotoxins í upprunalega vökvanum minnkaði verulega eftir ofsíun með mismunandi hlutfallslegum mólmassa. Eftir 100 kDa ofsíunarhimnuofsíun var innihald endotoxíns í vökvanum mun lægra en viðmiðunarmörkin 5,0EU·mL-1 í klínískri Shengmai inndælingu.

1.6 Umræður

Í þessari grein, byggt á áhrifum útsíunarhimnu úr PSO, kom í ljós að ginsenosíð Rg1,Re,Rb1 og schisandra A tapaði nánast ekki þegar útsíunarhimna með hlerun hlutfallslegs mólþunga upp á 100 kDa var notuð og endotoxín úr bakteríum í hægt væri að fjarlægja vökvann á áhrifaríkan hátt og uppfyllti kröfur um klínísk mörk. Í samanburði við virkt kolefni til að fjarlægja pýrógen getur ofsíunartækni ekki aðeins útrýmt vandamálum samkeppnisaðsogs og aðsogsmettunar, heldur einnig tryggt öryggi inndælingar að miklu leyti og veitt tilraunagrundvöll fyrir undirbúningsferli Shengmai inndælingar.

 

2. Áhrif hlerunar ofsíunarhimnu með mólþunga upp á 10kd á gjóskufjarlægingarferli venjulegs saltvatns

 

2.1 Inngangur

Við framleiðslu á pýrógenfríum líffræðilegum vörum kemur oft fyrir að utanaðkomandi endotoxín veldur háu pýrógeni og hægt er að leysa áhöld með þurrbakstri og natríumhýdroxíði í bleyti, en stórfelld undirbúningur lausnarinnar hentar ekki fyrir ofangreinda meðferð, og það er talið nota snertiflæðisfilmu umbúðir fyrir stórfellda lausn til að fá hæft endotoxín innihald.

 

2.2 Fjarlæging endotoxins

2.2.1 Ofsíunarmeðferð sýna

Endotoxín úr bakteríum er miklu minna en bakteríur, með A þvermál um 1-50nm, lípíð A er minna, lítið að stærð og létt, og endotoxín úr bakteríum hefur góða hitaþol. Almennt er snertiflæði ofursíunarhimnupakki 10kd notaður til að stöðva endotoxín og taka snertiflæðið í gegnum lausnina.

2.2.3 Niðurstöður tilrauna

Guidling Technology notaði PES efni 10kd himnusnælda til að framkvæma örsíunartilraun á fóðurvökvanum og niðurstöðurnar eru sem hér segir:

Niðurstöðurnar sýndu að ofsíunarhimnusnælda með hlerunarmólþunga 10kd framleidd með Guidling tækni gæti í raun fjarlægt endotoxín og aukið framleiðsluna enn frekar.

 

Um Guidling

Guidling Technology er innlent hátæknifyrirtæki sem leggur áherslu á líflyf, frumurækt, hreinsun og styrk líflækninga, greiningu og iðnaðarvökva. Við höfum þróað miðflótta síu tæki, ofursíun og örsíun snælda, vírus síu, TFF kerfi, dýpt síu, holur trefjar, o.fl. Sem uppfylla að fullu umsóknarsviðsmyndir líflyfja, frumuræktunar, og svo framvegis. Himnur okkar og himnusíur eru mikið notaðar við styrk, útdrátt og aðskilnað forsíunar, örsíunar, ofsíunar og nanósíunar. Margar vörulínur okkar, allt frá lítilli einnota rannsóknarstofusíun til framleiðslu síunarkerfa, ófrjósemisprófun, gerjun, frumurækt og fleira, uppfylla þarfir prófana og framleiðslu. Guidling Technology hlakkar til að vinna með þér!