Iðnaðar-Hreinsunarferli fyrir bóluefni fyrir bóluefni gegn nefsýkingu í nautgripum (IBR) - „Uttrafiltration“ hluti

Bovine infectious rhinotracheitis (IBR) er af völdum sýkingar með bovine infectious rhinotracheitis veiru (IBRV), einnig þekktur sem bovine herpesvirus type 1 (BHV-1). Sjúkdómurinn einkennist aðallega af einkennum frá öndunarfærum og fóstureyðingu. Auk þessara klínísku einkenna getur IBR leitt til minni mjólkurframleiðslu hjá mjólkurbúum og minni þyngdaraukningu hjá nautgripum, sem hefur í för með sér verulegt efnahagslegt tap fyrir búfjárbú.

Sjúkdómurinn er ónæmisbælandi í eðli sínu. Þegar hún kemur fram sem ein sýking er meinvirkni hennar tiltölulega lítil; Hins vegar, þegar blandaðar sýkingar með öðrum veiru- eða bakteríusjúkdómum koma fram, eykst alvarleiki og skaði verulega. Bólusetning er áhrifaríkasta aðferðin til að koma í veg fyrir og stjórna, með tvær megingerðir bóluefna í boði: lifandi veiklað bóluefni og óvirkjuð bóluefni. Sem stendur eru bóluefni gegn nefsýkingu í nautgripum, sem notuð eru á bæjum, aðallega óvirkjuð bóluefni.

Lifandi veikt bóluefni einkennast af sterkri ónæmisgetu, hröðu upphafs ónæmis og langri vernd (venjulega meira en sex mánuði). Þeir eru almennt notaðir til að bólusetja í neyðartilvikum meðan á sjúkdómsbrotum stendur. Hins vegar, þeir hafa í för með sér hugsanlega áhættu á vírusútfellingu, hafa í för með sér hættu fyrir þungaðar kýr og ekki er hægt að nota þær í leynilega sýkta en einkennalausa nautgripi.

Óvirkjuð bóluefni einkennast af miklu öryggi, engin hætta á að veirur losni eða snúist aftur yfir í meinvirkni og eru talin algerlega örugg. Þeir geta verið notaðir í nautgripi á öllum stigum, þar með talið þungaðar kýr, kálfa og undaneldisnaut. Hins vegar er upphaf ónæmis tiltölulega hægt og varnartíminn styttri, svo örvunarbólusetningar eru venjulega nauðsynlegar. Í sumum tilfellum getur verndandi virkni verið veikari en lifandi veiklaðra bóluefna.

Óháð því hvort lifandi veiklað bóluefni eða óvirkt bóluefni er notað, má skipta niðurstreymishreinsunarferlinu í fjögur meginþrep: uppskeru og skýringu → styrkur og frumhreinsun → fægjahreinsun → óvirkjun/sæfð síun og samsetning.

Styrkur er kjarnaskref í niðurstreymishreinsunarferli bóluefna, strax eftir skýringu. Meginmarkmið þess er að draga hratt úr uppskeru stóru-magni, lítilli-þéttni vírushreinsaðrar lausnar í lítið-rúmmál, há-þéttni á sama tíma og veirulífvirkni er viðhaldið. Þetta skapar nauðsynlegar aðstæður fyrir síðari há-upplausn en litla-afkastagetu fínhreinsunarskref, svo sem litskiljun.

Þetta skref er venjulega framkvæmt með því að nota snertiflæði ultrafiltration (TFF). Meginreglan er sem hér segir: veirufóðurlausnin rennur samsíða yfirborði ofsíunarhimnu með ákveðna holastærð. Undir þrýstingi fara litlar sameindir eins og vatn, sölt og ákveðin óhreinindi hornrétt í gegnum himnuna og eru fjarlægð, á meðan ósnortnar veiruagnir, sem eru mun stærri en himnuholurnar, haldast, stöðugt endurreist og þéttar. Í samanburði við hefðbundna-háhraða skilvindu er þessi aðferð mildari fyrir viðkvæma vírusa eins og IBRV, sem hafa lípíðhjúp. Það dregur á áhrifaríkan hátt úr skemmdum á byggingu veira og virknitapi af völdum mikilla klippikrafta og er hæfari fyrir línulegri mælikvarða-upp fyrir iðnaðarframleiðslu.

Árangursrík samþjöppunaraðgerð er miklu meira en bara að minnka rúmmál. Lykilatriði fyrir hagræðingu ferla eru: nákvæmlega stjórna yfirhimnuþrýstingi og fóðurflæðishraða til að koma jafnvægi á síunarnýtni á meðan að lágmarka styrkleikaskautun og himnuafgang; velja viðeigandi himnuefni og svitaholastærð til að tryggja mikla varðveislu vírusa og gegnsýringarflæði; og finna ákjósanlegasta jafnvægið milli bata vírusa, einbeitingarstuðs og vinnslutíma. Óblandaða veirusviflausnin nær ekki aðeins marktækt hærri títra heldur nær hún einnig bráðabirgðahreinsun með því að fjarlægja stóran hluta vatnsleysanlegra óhreininda.- Þetta veitir nauðsynlegan rúmmáls- og styrkleikagrunn fyrir síðari mikilvægar hreinsunarskref, svo sem litskiljun og kjarnameðferð, sem gerir einbeitingu að miðlægum skilvirknimiðstöð í öllu niðurstreymisferlinu.

Aukasíun er mikilvægt skref í niðurstreymishreinsun bóluefnis, staðsett eftir fínhreinsun og fyrir samsetningu. Það er venjulega framkvæmt í kjölfar litskiljunar og nukleasameðferðar. Kjarnatilgangur þess er ekki upphafsstyrkur, heldur kerfisskipti og nákvæm aðlögun á endanlegu efnablöndunni. Ferlið er framkvæmt í snertiflæðis ultrafiltration (TFF) kerfi, þar sem fersku, hreinu blöndunarbuffi er stöðugt bætt við óblandaða veirulausnina í blóðrásinni, á meðan upprunalega leysirinn og lítil-sameindaóhreinindi eru fjarlægð. Þessi aðgerð fjarlægir á áhrifaríkan og varlegan hátt leifar af söltum, lífrænum leysum, kjarna niðurbrotsafurðum og snefilleysanlegum óhreinindum sem eftir eru af hreinsunarferlinu.

Lykillinn er að viðhalda stöðugu rúmmáli eða beita minniháttar styrkleiðréttingum til að tryggja að veirustyrkurinn uppfylli forskriftir lyfjaformsins. Fyrir viðkvæmar, hjúpaðar vírusa eins og nautgripasmitandi nefslímubólguveiru (IBRV), er mildt vatnsaflsumhverfi efri síusíunar mikilvægt til að varðveita heilleika agna og ónæmingargetu. Að lokum veitir þetta skref traustan grunn fyrir síðari óvirkjun (ef þess er þörf), viðbót við hjálparefni eða sveiflujöfnun og endanlega fyllingu, sem tryggir að lokaafurðin komist inn í samsetninguna með skilgreindum íhlutum, einsleitum aðstæðum og góðu samhæfni. Það er því eitt af kjarnaskrefunum til að tryggja öryggi bóluefnis, stöðugleika og samkvæmni -í-lotu.

IBRV er hjúpuð, tvíþátta- línuleg DNA veira með um það bil kúlulaga hjúp. Þroskaðar IBRV agnir hafa um 160–230 nm þvermál. Í samræmi við það, með því að nota 100, 300 eða 500 kDa ofsíunarhimnur getur haldið IBRV á meðan sum mengandi prótein eru fjarlægð. Endursíunarhlutfall Jiuling Technology himnusnælda er breytilegt eftir tegund fóðurefnis, en nær yfirleitt 90–95%.